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熒光顯微鏡和倒置顯微鏡的區(qū)別有哪些?
在細胞培養(yǎng)及相關(guān)衍生實驗中,顯微鏡是一個很重要的儀器。目前,市場上有各種類型的顯微鏡,選擇一款符合需求又適用的顯微鏡是一個挑戰(zhàn),下面為大家介紹倒置顯微鏡和熒光顯微鏡的原理,便于大家選擇。
倒置顯微鏡組成和普通顯微鏡一樣,主要包括三部分:機械部分、照明部分、光學(xué)部分。
倒置顯微鏡組成和普通正置顯微鏡一樣,只不過物鏡與照明系統(tǒng)顛倒,前者在載物臺之下,后者在載物臺之上。
這樣的構(gòu)造使得照明聚光系統(tǒng)與載物臺的有效距離可以顯著擴大,便于放置培養(yǎng)皿、細胞培養(yǎng)瓶等較厚的待觀察器具(當然載玻片等也可以),而同時物鏡與材料之間的工作距離不必很大。
倒置顯微鏡供醫(yī)療衛(wèi)生單位、高等院校、研究所用于微生物、細胞、細菌、組織培養(yǎng)、懸浮體、沉淀物等的觀察,可連續(xù)觀察細胞、細菌等在培養(yǎng)液中繁殖分裂的過程,并可將此過程中的任一形態(tài)拍攝下來。
在細胞學(xué)、寄生蟲學(xué)、腫瘤學(xué)、免疫學(xué)、遺傳工程學(xué)、工業(yè)微生物學(xué)、植物學(xué)等領(lǐng)域中應(yīng)用廣泛。
熒光顯微鏡用于研究細胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。
對被檢物體來說,熒光產(chǎn)生方式有兩種:自發(fā)熒光,經(jīng)過紫外照射直接發(fā)出熒光;繼發(fā)熒光,被觀察物體經(jīng)過熒光染料處理之后,經(jīng)過紫外光照射才能發(fā)出熒光。
細胞中有些物質(zhì),如葉綠素等,受紫外線照射后產(chǎn)生自發(fā)熒光;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)出繼發(fā)熒光。
熒光顯微鏡利用一個高發(fā)光效率的點光源,經(jīng)過濾色系統(tǒng)發(fā)出一定波長的光(紫外光365nm或紫藍光420nm)作為激發(fā)光、激發(fā)標本內(nèi)的熒光物質(zhì)發(fā)射出各種不同顏色的熒光后,再通過物鏡和目鏡的放大進行觀察。
這樣在強烈的對襯背景下,即使熒光很微弱也易辨認,敏感性高,主要用于細胞結(jié)構(gòu)和功能以及化學(xué)成分等的研究。